Distribution of cysts holding Ascocotyle (Phagicola) longa metacercariae in tissues and organs of mugilid / Distribuição de cistos contendo metacercárias de Ascocotyle (Phagicola) longa em tecidos e órgãos de mugilídeos

Abstract Ascocotyle (Phagicola) longa is an etiological agent of human phagicolosis. Mugilids are the second intermediate host, the first being Heleobia australis, and mugilids predatory birds and mammals are its definitive hosts. The occurrence of cysts holding A. longa metacercariae is described in mugilids with a prevalence of up to 100%. The wide geographical distribution of A. longa and its intermediate hosts coupled with the rise in the consumption of raw or poorly cooked fish may elevate the risk of human infection. Therefore, in this study, we aimed to verify the distribution pattern of cysts holding A. longa in mugilids. The tissue and organ samples of these fish were processed in a domestic blender and examined under a stereoscopic microscope to identify the cysts holding the digenetic metacercariae. Of the 24 (100%) fish samples that were analyzed, 12 of Mugil curema and 12 of Mugil liza possessed cysts holding A. longa metacercariae. Digenetic cysts were identified to be present in the gills, heart, stomach, liver, intestines, mesentery, and muscular tissues collected from M. curema and M. liza. Conclusively, in M. curema, the cysts holding A. longa metacercariae were found to be distributed randomly throughout the fish body in almost every tissue and organ that was examined.

Resumo Ascocotyle (Phagicola) longa é o agente etiológico da fagicolose humana. Os mugilídeos são os segundos hospedeiros intermediários. O primeiro é Heleobia australis e pássaros e mamíferos predadores de mugilídeos, os hospedeiros definitivos. A ocorrência de cistos contendo metacercárias de A. longa é descrita em mugilídeos, com até 100% de prevalência. A ampla distribuição geográfica de A. longa e seus hospedeiros intermediários, acompanhado do aumento do consumo de peixe cru ou mal cozido, pode aumentar o risco de infecção humana, portanto o objetivo do presente estudo foi verificar o padrão de distribuição de cistos, contendo metacercárias de A. longa, em mugilídeos. Amostras de tecidos e órgãos desses peixes foram processadas em liquidificador doméstico e observadas em microscópio estereoscópico à procura de cistos contendo metacercárias do digenético. Todos os 24 (100%) mugilídeos, 12 Mugil curema e 12 Mugil liza examinados apresentaram cistos contendo metacercária de A. longa. Foram observados cistos do digenético nas brânquias, coração, estômago, fígado, intestino, mesentério e tecido muscular de M. curema e de M. liza. Em M. curema, os cistos contendo metacercárias de A. longa estão distribuídos de forma aleatória por praticamente todos os tecidos e órgãos dos mugilídeos examinados.

Haematology of Mugil curema from the north coast estuary of Santa Catarina state, Brazil / Hematologia de Mugil curema em estuário no litoral norte do estado de Santa Catarina, Brasil

Mugil curema is a teleost fish often found in coastal, estuarine and lagoon regions throughout the Brazilian coast. Blood parameters may be used as health and welfare indicators of the fish, as well as the environment they live in. The aim of this study was to verify the hematologic profile of the M.curema along 18 months in estuary waters from the north coast of the state of Santa Catarina in the south of Brazil. A total of 133 M. curema fish were captured from March 2016 to August 2017. Erythrogram, leukogram, thrombocytogram, hematocrit percentage, hemoglobin dosage, total plasma protein dosage, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) and medium corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) were analyzed. There was no significant difference (P>0.05) on the total number of erythrocytes between the fish gender. However, there was difference on the hematocrit between males and indefinite gender fish. The influences of temporal and geographical space, among the values of hematological parameters, in the different studies of the Brazilian coast are discussed.. The present research is an important contribution to establish a hematological pattern for M. curema. The local population of the studied fish has a proper behavior in hematological descriptors, which is different from other Brazilian coast studies with the same fish species.

Mugil curema é um peixe teleósteo, abundante em regiões costeiras, estuarinas e lagunares, em todo o litoral brasileiro. Os parâmetros sanguíneos podem ser usados como indicadores da saúde e do bem-estar dos peixes, bem como do ambiente onde estes vivem. O objetivo deste estudo foi verificar o perfil hematológico de M. curema ao longo de 18 meses, em águas estuarinas, no Litoral norte do estado de Santa Catarina, sul do Brasil. Um total de 133 peixes foram capturados, entre março de 2016 e agosto de 2017, para realização de eritrograma, leucograma, trombocitograma, porcentagem de hematócrito, dosagem de hemoglobina, dosagem de proteína plasmática total, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM). Não houve diferença significativa (P>0,05) entre o número total de eritrócitos entre machos e fêmeas. No entanto, houve diferença no hematócrito, entre machos e peixes de sexo indeterminado. As influências do espaço temporal e geográfico, entre os valores dos parâmetros hematológicos, nos diferentes estudos do litoral brasileiro são discutidas. A presente investigação é importante contribuição para o estabelecimento de um padrão hematológico para M. curema. A população local de peixes estudada tem comportamento próprio em descritores hematológicos, diferenciado de outros estudos no litoral brasileiro para a mesma espécie.

Haematology of Mugil curema from the north coast estuary of Santa Catarina state, Brazil / Hematologia de Mugil curemaem estuário no litoral norte do estado de Santa Catarina, Brasil

Mugil curema é um peixe teleósteo, abundante em regiões costeiras, estuarinas e lagunares, em todo o litoral brasileiro. Os parâmetros sanguíneos podem ser usados como indicadores da saúde e do bem-estar dos peixes, bem como do ambiente onde estes vivem. O objetivo deste estudo foi verificar o perfil hematológico de M. curema ao longo de 18 meses, em águas estuarinas, no Litoral norte do estado de Santa Catarina, sul do Brasil. Um total de 133 peixes foram capturados, entre março de 2016 e agosto de 2017, para realização de eritrograma, leucograma, trombocitograma, porcentagem de hematócrito, dosagem de hemoglobina, dosagem de proteína plasmática total, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM). Não houve diferença significativa (P>0,05) entre o número total de eritrócitos entre machos e fêmeas. No entanto, houve diferença no hematócrito, entre machos e peixes de sexo indeterminado. As influências do espaço temporal e geográfico, entre os valores dos parâmetros hematológicos, nos diferentes estudos do litoral brasileiro são discutidas. A presente investigação é importante contribuição para o estabelecimento de um padrão hematológico para M. curema. A população local de peixes estudada tem comportamento próprio em descritores hematológicos, diferenciado de outros estudos no litoral brasileiro

Mugil curema is a teleost fish often found in coastal, estuarine and lagoon regions throughout the Brazilian coast. Blood parameters may be used as health and welfare indicators of the fish, as well as the environment they live in. The aim of this study was to verify the hematologic profile of the M.curema along 18 months in estuary waters from the north coast of the state of Santa Catarina in the south of Brazil. A total of 133 M. curema fish were captured from March 2016 to August 2017. Erythrogram, leukogram, thrombocytogram, hematocrit percentage, hemoglobin dosage, total plasma protein dosage, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) and medium corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) were analyzed. There was no significant difference (P>0.05) on the total number of erythrocytes between the fish gender. However, there was difference on the hematocrit between males and indefinite gender fish. The influences of temporal and geographical space, among the values of hematological parameters, in the different studies of the Brazilian coast are discussed.. The present research is an important contribution to establish a hematological pattern for M. curema. The local population of the studied fish has a proper behavior in hematological descriptors, which is different from other Brazilian coast studies with the same fish species.

Scuticociliatosis caused by Uronema sp. in ten different ornamental aquarium reef fish in Brazil / Scuticociliatose causado por Uronema sp. em dez diferentes peixes ornamentais de recife no Brasil

Abstract Scuticociliatosis, caused by an opportunistic ciliate protozoan, is responsible for significant economic losses in marine ornamental fish. This study reports the occurrence of Uronema spp., parasitizing ten species of marine reef fish at an ornamental fish wholesaler: Blue green damselfish (Chromis viridis), Vanderbilt's Chromis (Chromis vanderbilti), Pennant coralfish (Heniochus acuminatus), Threespot angelfish (Apolemichthys trimaculatus), Goldspotted angelfish (Apolemichthys xanthopunctatus), Sea goldie (Pseudanthias squamipinnis), Orchid dottyback (Pseudochromis fridmani), Threadfin butterflyfish (Chaetodon auriga), Vagabond butterflyfish (Chaetodon vagabundus), and Bluecheek butterflyfish (Chaetodon semilarvatus). Diseased fish showed disorders such as hemorrhages and ulcerative lesions on the body surface. Histopathological analysis of the muscle, liver, gut, kidney, spleen, gills, and stomach revealed hemorrhages and degeneration of muscle fiber, vacuolar degeneration of hepatocyte, inflammatory process and granuloma in the liver, atrophy of intestinal villi, inflammatory process and granuloma in the kidney, melanomacrophage centers, as well as inflammatory process in the spleen, epithelial cells hyperplasia and granuloma formation in the gills, and vacuolar degeneration and eosinophils in the stomach. Due to the severity of the disease, it is necessary to implement biosecurity measures with rapid and accurate diagnosis to minimize the risk of economic losses caused by Uronema spp.

Resumo Scuticociliatose, causada pelo protozoário ciliado oportunista, é responsável por significativas perdas econômicas em peixes marinhos ornamentais. O estudo relata a ocorrência de Uronema spp., parasitando dez espécies de peixes de recife em um distribuidor de peixes ornamentais: "Blue green damselfish" (Chromis viridis), "Vanderbilt's Chromis" (Chromis vanderbilti), "Pennant coralfish" (Heniochus acuminatus), "Threespot angelfish" (Apolemichthys trimaculatus), "Goldspotted angelfish" (Apolemichthys xanthopunctatus), "Sea goldie" (Pseudanthias squamipinnis), "Orchid dottyback" (Pseudochromis fridmani), "Threadfin butterflyfish" (Chaetodon auriga), "Vagabond butterflyfish" (Chaetodon vagabundus), e "Bluecheek butterflyfish" (Chaetodon semilarvatus). Peixes doentes apresentaram distúrbios como hemorragias e lesões ulcerativas na superfície do corpo. A análise histopatológica do músculo, fígado, intestino, rim, baço, brânquias e estômago revelou hemorragias e degeneração das fibras musculares, degeneração vacuolar de hepatócitos, processo inflamatório e granuloma no fígado, atrofia das vilosidades intestinais, processo inflamatório e granuloma no rim, centros de melanomacrófagos e processo inflamatório no baço, hiperplasia das células epiteliais, bem como formação de granuloma nas brânquias e degeneração vacuolar e eosinófilos no estômago. Devido à gravidade da doença, é necessário implementar medidas de biossegurança com diagnóstico rápido e preciso para minimizar o risco de perdas econômicas causadas por Uronema spp.

Cryptocaryon irritans, a ciliate parasite of an ornamental reef fish yellowtail tang Zebrasoma xanthurum / Cryptocaryon irritans, parasito ciliado do peixe ornamental de recife "yellowtail tang" Zebrasoma xanthurum

Abstract Cryptocaryon irritans is an obligate parasitic ciliate protozoan of wild and cultured marine fish. It causes white spot disease, and infections with this pathogen can cause significant losses for aquarists and commercial marine cultures worldwide. This study reports the occurrence of C. irritans parasitizing the ornamental reef fish, yellowtail tang, Zebrasoma xanthurum. Six days after being introduced to a new environment, 11 yellowtail tangs had white spots scattered across their bodies and fins. Suspicion of infection with C. irritans was evaluated by scraping the skin to confirm clinical diagnosis. After confirmation, the yellowtail tangs were transferred to a hospital aquarium and treated with the therapeutic agent Seachem Cupramine® for 15 days. During the treatment period, the copper concentration was monitored daily. At the end of the treatment, none of the yellowtail tangs showed clinical signs of white spots on their bodies, and skin scraping confirmed the yellowtail tangs were no longer infected. Subsequently, the yellowtail tangs were released for sale.

Resumo Cryptocaryon irritans é um protozoário ciliado parasita obrigatório de peixes marinhos selvagens e cultivados. Causa a doença dos "pontos brancos". Infecções por esse patógeno pode causar perdas significativas para aquaristas e para marinocultura comercial em todo o mundo. Este estudo relata a ocorrência de C. irritans parasitando a espécie de peixe ornamental de recife Zebrasoma xanthurum. Seis dias após serem introduzidos no novo ambiente, onze peixes apresentaram pontos brancos espalhados pelo corpo e nadadeiras. Suspeitando de infecção por C. irritans foi realizado raspado de pele para confirmar o diagnóstico clínico. Após a confirmação, os peixes foram transferidos para um aquário hospital e tratados com o agente terapêutico Seachem Cupramine® por 15 dias. Durante o período de tratamento o monitoramento da concentração de cobre foi diário através da utilização de um fotômetro. Após o final do tratamento, todos os peixes já não apresentavam mais sinais clínicos de pontos brancos pelo corpo, e foram negativos no raspado de pele, sendo foram encaminhados para comercialização.

Neobenedenia melleni (Monogenea: Capsalidae) in ornamental reef fish imported to Brazil / Neobenedenia melleni (Monogenea: Capsalidae) em peixes ornamentais de recife importados para o Brasil

Abstract The capsalid monogenean Neobenedenia melleni is known as a lethal pathogen for captured marine teleost ornamental fish, if left untreated. This study reports the occurrence of N. melleni parasitizing four species of ornamental reef fish imported into Brazil and maintained in quarantine: Arabian angelfish (Pomacanthus asfur ), yellowbar angelfish (Pomacanthus maculosus), regal angelfish (Pygoplites diacanthus), and bluecheek butterflyfish (Chaetodon semilarvatus). Ten days after the beginning of quarantine, some fish showed behavioral alterations, such as irritability, and corneal opacity, which were rapidly diagnosed to be caused by monogenean parasites by body surface scraping. The fish from the same batch were treated with two applications of 2 mg L-1 praziquantel each at an interval of four days. Seven days after the first treatment, the mucus surface of the fish was re-examined, which did not reveal the parasites presence being delivered for commercialization.

Resumo Neobenedenia melleni é conhecido como um parasito letal para peixes teleósteos ornamentais marinhos capturados se não tratado. Este estudo relata a ocorrência de N. melleni parasitando quatro espécies de peixes ornamentais importados para o Brazil: Arabian angelfish (Pomacanthus asfur), yellowbar angelfish (Pomacanthus maculosus), regal angelfish (Pygoplites diacanthus) e bluecheek butterflyfish ( Chaetodon semilarvatus). Dez dias depois do início da quarentena, foram observados irritabilidade e opacidade na córnea dos peixes que, foram diagnosticadas com N. melleni na superfície corporal. Todos os peixes foram tratados com duas aplicações de praziquantel 2 mg L-1 em intervalo de quatro dias. Sete dias após o início do tratamento, um novo exame parasitológico foi realizado o qual não revelou a presença dos parasitos, sendo liberados para comercialização.

Changes in hematological and biochemical parameters of tambaqui (Colossoma macropomum ) parasitized by metazoan species / Alterações nos parâmetros hematológicos e bioquímicos de tambaqui (Colossoma macropomum) parasitado por espécies de metazoários

Abstract The aim of this study was to evaluate the impacts of metazoan parasites on hematological and biochemical parameters and relative condition factor of tambaqui (Colossoma macropomum ) farmed in northern Brazil. A total of 32 juvenile fish were captured from a commercial fish farm located in the municipality of Rio Preto da Eva, Amazonas state, Brazil. Parasite prevalence was 100% for Anacanthorus spathulatus, Mymarothecium boegeri and Notozothecium janauachensis, 100% for Neoechinorhynchus buttnerae and 53.13% for Dolops geayi. The greatest mean parasite intensity was found in acantocephalans followed by monogeneans and branchiuran crustaceans. A negative correlation was observed between abundance of N. buttnerae and hematocrit percentage, hemoglobin concentration, total thrombocyte count and glucose and between abundance of the monogenean and glucose concentration. Parasitic infections caused damage in tambaqui in terms of the observed hematological parameters that were characterized by hypochromic anemia and thrombocytopenia, which are important parameters to be used in parasitic diagnosis. This study is the first record of the occurrence of Dolops geayi in farmed tambaqui in the Amazon.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto do parasitismo por metazoários sobre os parâmetros hematológicos, bioquímicos e fator de condição relativo de tambaquis (Colossoma macropomum) cultivados na região Norte do Brasil. Foram coletados 32 tambaquis em fase de engorda numa piscicultura comercial no município de Rio Preto da Eva, estado do Amazonas, Brasil. A prevalência de parasitos foi de 100% para Anacanthorus spathulatus, Mymarothecium boegeri e Notozothecium janauachensis, 100% para Neoechinorhynchus buttnerae e 53,13% para Dolops geayi. A maior intensidade média foi de acantocéfalos, seguida por monogenéticos e branquiúros. Correlação negativa significativa foi observada entre abundância de N. buttnerae e os parâmetros de hematócrito, concentração de hemoglobina, trombócitos totais e glicose, bem como entre a abundância de monogenéticos e glicose. A infecção por parasitos metazoários foi capaz de debilitar os tambaquis como observado por meio das alterações hematológicas; sendo este quadro de anemia hipocrômica e trombocitopenia importante para ser utilizado no diagnóstico destas parasitoses. Este estudo foi o primeiro registro da ocorrência de Dolops geayi em tambaquis cultivados na Amazônia.

In vitro culture of Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala: Neoechinorhynchidae): Influence of temperature and culture media / Cultivo in vitro de Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala: Neoechinorhynchidae): influência da temperatura e dos meios de cultura

Abstract Infection by the acantocephalan Neoechinorhynchus buttnerae is considered one of most important concerns for tambaqui fish (Colossoma macropomum ) production. Treatment strategies have been the focus of several in vivo studies; however, few studies have been undertaken on in vitro protocols for parasite maintenance. The aim of the present study was to develop the best in vitro culture condition for N. buttnerae to ensure its survival and adaptation out of the host to allow for the testing of substances to be used to control the parasite. To achieve this, parasites were collected from naturally infected fish and distributed in 6-well culture plates under the following treatments in triplicate: 0.9% NaCl, sterile tank water, L-15 Leibovitz culture medium, L-15 Leibovitz + agar 2% culture medium, RPMI 1640 culture medium, and RPMI 1640 + agar 2% culture medium. The plates containing the parasites were maintained at 24 °C, 28 °C, and 32 °C. The RPMI 1640 + agar 2% culture medium showed the best survival of 24 days at 24 °C. No body alterations such as swollen parasites, body deformation, dehydration and hardening were observed in the RPMI 1640 + 2% culture medium.

Resumo A infecção pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae é considerada uma das preocupações mais importantes para produção de tambaqui (Colossoma macropomum). Estratégias de tratamento têm sido o foco de vários estudos in vivo ; entretanto, poucos estudos foram realizados em protocolos in vitro para manutenção do parasito. O objetivo deste estudo foi desenvolver a melhor condição de cultura in vitro para N. buttnerae para garantir sua sobrevivência e adaptação fora do hospedeiro, a ser utilizado para teste com substâncias no controle do parasito. Para isso, os parasitos foram coletados de peixes naturalmente infectados e distribuídos em placas de cultura de 6 poços sob os seguintes tratamentos em triplicata: 0.9% NaCl, água estéril do tanque, meio de cultura L-15 Leibovitz, meio de cultura L-15 Leibovitz + ágar 2%, meio de cultura RPMI 1640, e meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2%. As placas contendo os parasitos foram mantidos a 24 °C, 28 °C, e 32 °C. O meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2% apresentou a melhor sobrevivência de 24 dias a 24 °C. Nenhuma alteração corporal tais como inchaço dos parasitos, deformação corporal, desidratação e endurecimento foram observados no meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2%.

Induced aerocystitis and hemato-immunological parameters in Nile tilapia fed supplemented diet with essential oil of Lippia alba / Aerocistite induzida e parâmetros hemato-imunológicos em tilápia do Nilo suplementada com óleo essencial de Lippia alba

The present study evaluated the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish fed supplemented diet with essential oil of L. alba (4 mL kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish fed supplemented diet with cereal alcohol injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet with essential oil injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet and noninjected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed 6 h after inflammatory stimulus. Carrageenin-injected fish showed acute inflammatory reaction in the swim bladder characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was significantly higher in fish fed L. alba when compared to other treatments. No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, influence of dietary supplementation was observed on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulatory characteristic.(AU)

O presente estudo avaliou a suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas à inflamação aguda induzida por carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quarto tratamentos em triplicata: a) peixes suplementados com óleo esencial de L. alba (4 mL kg-1 de ração) injetados com carragenina; b) peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; c) peixes não suplementados não injetados. Os níveis de cortisol, eritrograma, leucograma e o infiltrado inflamatório foram analisados seis horas após o estímulo inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram reação inflamatória aguda na bexiga natatória caracterizada por maior infiltrado de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi significativamente maior nos peixes suplementados com L. alba quando comparado aos outros tratamentos. Não houve diferença nos níveis de cortisol. Para a dose, o tempo e a forma de administração testada, a suplementação com óleo essencil de L. alba não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, foi constatada influência da suplementação dietária no número de neutrófilos após a aerocistite enfatizando a sua característica imunomoduladora.(AU)

Evaluation of eugenol toxicity in bioassays with test-organisms / Avaliação da toxicidade do eugenol em bioensaios com organismos-teste

ABSTRACT: Fish in both natural and farming conditions are exposed to stress of capture, handling, transport or treatment that provoke low zootechnical performance. Anesthetics like eugenol obtained from clove oil have been used strategically not only in freshwater but also in marine and estuarine fish in order to reduce the stress. Apart from the eugenol indication as anesthetic and its low toxicity for animals, its environment action is not clear. Bioassays or ecotoxicity tests with indicator organisms are used to evaluate the mode of action of the pollutants in the environment. The aim of this study was to test the acute toxicity of eugenol using the microcrustacean Daphnia magna and the bacterium Aliivibrio fischeri, and also its chronic toxicity for the algae Desmodesmus subspicatus. Eugenol in the concentrations of 50, 75 and 100mg L-1 were toxic to tested indicator organisms.

RESUMO: Os peixes, seja em ambiente natural ou em piscicultura, sofrem efeito do estresse na captura, manejo, transporte ou tratamentos que provocam baixo desempenho zootécnico. Anestésicos, como o eugenol, obtido a partir do óleo de cravo, tem sido usado estrategicamente não só em peixes de água doce, mas também em peixes marinhos e estuarinos para reduzir o estresse. Apesar da indicação de eugenol como anestésico em peixes e da sua baixa toxicidade para estes animais, não se tem clareza da sua ação sobre o ambiente. Bioensaios ou testes de ecotoxicidade com organismos indicadores são usados em para avaliar o modo de ação de poluentes no ambiente. O objetivo deste estudo foi testar a toxicidade aguda do eugenol utilizando o microcrustáceo Daphnia magna e a bactéria Aliivibrio fischeri e sua toxicidade crônica para alga Desmodesmus subspicatus. O eugenol, nas concentrações de 50, 75 e 100mg L-1, foi tóxico para organismos indicadores testados.

Hydrogen peroxide and chlorine dioxide against parasite Ichthyophthirius multifiliis (Protozoa, Ciliophora) in jundiá fingerlings / O peróxido de hidrogênio e dióxido de cloro no combate ao parasito Ichthyophthirius multifiliis (Protozoa, Ciliophora) em alevinos de jundiá

ABSTRACT: Ichthyophthiriasis is a worldwide fish disease with great financial impact on freshwater fish farming due to its associated high mortality rates. Current study assesses the parasiticidal capacity of hydrogen peroxide (H2O2) and chlorine dioxide (ClO2) against the causative agent, Ichthyophthirius multifiliis, in jundiá. Median lethal concentration (LC50, 96h) of each chemical agent was established, as well as the minimum inhibitory concentration of hydrogen peroxide for the parasite´s infectious larval phase (theront). Products were tested asynchronously in parasitized fingerlings for short and long baths at the following concentrations and exposure times: 1. Hydrogen peroxide: (T1) continuous bath - 30ppm and (T2) 50ppm; (T3) short bath - 150ppm, during 1h and (T4) 250ppm during 1h; control group (without any chemical agent). 2. Chlorine dioxide: (T1) continuous bath - 4ppm and (T2) 20ppm; (T3) short bath - 200ppm, during 1min; (T4) short bath - 400ppm, during 1min and control group. Data analysis demonstrated a concentration of 82.54ppm of the commercial product (or 24.76ppm of the active chemical agent) as LC50, 96h of H2O2 and 38.4ppm product (or 2.68ppm of the active chemical agent) for ClO2. Hydrogen peroxide concentration causing 100% mortality rate of theronts in 1h was 25ppm (product, or 7.5ppm of the active chemical agent). At the end of the fourth day of curative experiment, 98% of the animals died by ichthyophthiriasis. No treatment was effective against the parasite.

RESUMO: A ictiofitiríase em peixes tem distribuição mundial e forte impacto econômico na piscicultura de água doce devido às altas taxas de mortalidade associadas. Este estudo avaliou o uso do peróxido de hidrogênio (H2O2) e do dióxido e cloro (ClO2) no controle do parasito protozoário Ichthyophthirius multifiliis em jundiá. A concentração letal mediana (CL50, 96h) de cada agente químico foi estabelecida, assim como a concentração mínima inibitória do peróxido de hidrogênio para a fase larval infecciosa do parasito (teronte). Os agentes foram testados assincronicamente em alevinos parasitados na forma de banhos de curta e longa duração, nas seguintes concentrações e tempos de exposição: 1. Peróxido de hidrogênio: (T1) banho contínuo - 30ppm e (T2) 50ppm; (T3) banho curto - 150ppm com duração de 1h e (T4) 250ppm com duração de 1h, além de um grupo controle (sem a adição do agente químico). 2. Dióxido de cloro: (T1) banho contínuo - 4ppm; (T2) banho contínuo - 20ppm; (T3) banho curto - 200ppm, com duração de 1min; (T4) banho curto - 400ppm, com duração de 1min, além de um grupo controle. A análise dos dados indicou a concentração de 82,54ppm do produto comercial utilizado (ou 24,76ppm do princípio ativo) como a Cl50, 96h de H2O2 e de 38,4ppm produto (ou 2,68ppm do princípio ativo) para o ClO2. A concentração de H2O2 que causou 100% de mortalidade dos terontes em 1h foi de 25ppm (do produto, ou 7,5ppm do princípio ativo). Ao final do quarto dia de experimento curativo, 98% dos animais morreram devido à ictiofitiríase. Nenhum dos tratamentos foi efetivo frente à parasitose.

First report of scuticociliatosis caused by Uronema sp. in ornamental reef fish imported into Brazil / Primeiro relato de scuticociliatose causada por Uronema sp. em peixes ornamentais de recife importados para o Brasil

Abstract Scuticociliatosis, which is caused by an opportunistic ciliate protozoan, is responsible for significant economic losses in marine ornamental fish. This study reports the occurrence of Uronema sp., which was found to be parasitizing three species of marine reef fish imported into Brazil and maintained in quarantine: Vanderbilt's Chromis (Chromis vanderbilti), blue-green damselfish (Chromis viridis), and sea goldie (Pseudanthias squamipinnis). During the quarantine period, some fish presented with behavioral disorders and hemorrhages and ulcerative lesions on the body surface. Histopathological analysis showed hemorrhages, inflammation comprising mononuclear and granular cells in the skeletal muscle, and necrosis of the skin and the secondary lamellae of the gills, and parasites were also observed in the renal capsule. The absence of transboundary measures available to prevent the occurrence of ornamental fish diseases is also discussed.

Resumo Scuticociliatose, causada por protozoários ciliados oportunistas, é responsável por perdas econômicas significativas em peixes ornamentais marinhos. O presente estudo relata a ocorrência de Uronema sp., parasitando três espécies de peixes ornamentais de recife importados para o Brasil e mantidos em quarentena: Vanderbilt's Chromis (Chromis vanderbilti), blue-green damselfish (Chromis viridis), e sea goldie (Pseudanthias squamipinnis). Durante o período de quarentena, alguns peixes apresentaram alterações comportamentais tais com hemorragias e lesões ulcerativas na superfície da pele. A histopatologia mostrou hemorragias, inflamação com células mononucleares e granulares na musculatura, e necrose da pele e lamelas secundárias das brânquias, e parasitas também foram observados na cápsula renal. A ausência de medidas transfronteiriças disponíveis para prevenir a ocorrência de doenças de peixes ornamentais também é discutida.

Braga nasuta (Cymothoidae): an ectoparasite of the Giant Amazonian fish Arapaima gigas (Osteoglossidae) fingerlings cultured in the Amazon region in Northern Brazil / Braga nasuta (Cymothoidae): um ectoparasito de alevinos do peixe gigante da Amazônia Arapaima gigas (Osteoglossidae), cultivado na região Amazônica, no Norte do Brasil

Isopods Cymothoidae are organisms that parasitize several fish species, both marine and freshwater, provoking important physiological alterations and secondary infections. The genus Braga was proposed to harbor three species of parasitic isopods in freshwater fish from South America: B. brasiliensis, B. cichlae and B. nasuta. Posteriorly, other four species were included: B. patagonica, B. amapaensis, B. fluviatilis and B. bachmanni. Regarding the geographical distribution of the genus, there are registers in Brazil, Argentina, Suriname and Paraguay. In this study, 3,625 fingerlings of pirarucu Arapaima gigas were examined from a commercial fish farm in the Amazon region, Pará State, to observe and identify possible parasites. A total of eleven ectoparasitic isopods were carefully removed from the body surface of the hosts and fixed in alcohol 70%. They were processed and identified as Braga nasuta. Parasitological indexes were prevalence of 0.303%, mean intensity of 1.000±0.000 and mean abundance of 0.003±0.055. This is the first report of B. nasuta in pirarucu fingerlings.

Isópodes Cymothoidae são organismos que parasitam ampla variedade de espécies de peixes, tanto marinhos quanto dulcícolas, provocando importantes alterações fisiológicas e infecções secundárias. O gênero Braga foi proposto inicialmente para abrigar três espécies de isópodes parasitos de peixes de água doce da América do Sul: B. brasiliensis, B. cichlae e B. nasuta; posteriormente, outras quatro espécies foram inseridas: B. patagônica, B. amapaensis, B. fluviatilis e B. bachmanni. Em relação à distribuição geográfica das espécies deste gênero, há registros no Brasil, na Argentina, em Suriname e no Paraguai. Neste estudo, 3.625 alevinos de pirarucu Arapaima gigas de uma piscicultura comercial na região amazônica, Estado do Pará, foram examinados para observar e identificar possíveis parasitos. Ao total, foram encontrados onze isópodes ectoparasitos, cuidadosamente retirados da superfície corporal de hospedeiros e fixados em álcool 70%. Eles foram processados e identificados como Braga nasuta. Os índices parasitológicos tiveram prevalência de 0,303%, intensidade media de 1.000±0.000 e abundância média de 0,003±0,055. Este é o primeiro relato de B. nasuta em alevinos de pirarucu.

First record of Hamaticolax scutigerulus (Copepoda: Bomolochidae) in Brazil, ectoparasite of the spotted goatfish Pseudupeneus maculatus (Actinopterygii: Mullidae) / Primeiro registro de Hamaticolax scutigerulus (Copepoda: Bomolochidae), parasito de saramunete Pseudupeneus maculatus (Actinopterygii: Mullidae), no Brasil

Bomolochidae Claus, 1875 is a copepod family with worldwide distribution that parasitizes marine fishes. This study provides the first report of Hamaticolax scutigerulus (Wilson, 1935) (Copepoda: Bomolochidae) in the spotted goatfish Pseudupeneus maculatus (Bloch, 1793), in the coastal waters of Pernambuco, northeastern Brazil. Prevalence of 35%, mean intensity of infestation of 1.9±1.3 and mean abundance of 0.7±1.2 were found. The setae and spines of the leg armor of the Hamaticolax species were analyzed to identify the present species.

Bomolochidae Claus, 1875, é uma família de copépodes cujas espécies encontram-se amplamente distribuídas pelo mundo e são parasitas de peixes marinhos. Este estudo relata, pela primeira vez, Hamaticolax scutigerulus (Wilson, 1935) (Copepoda: Bomolochidae) no saramunete Pseudupeneus maculatus (Bloch, 1793) do litoral de Pernambuco, nordeste do Brasil. Prevalência de 35%, intensidade média de infestação de 1,9±1,3 e abundância média de 0,7±1,2 foram observadas. As setas e os espinhos da armadura das pernas do parasito das espécies de Hamaticolax foram analisadas para identificar a presente espécie.

Neobenedenia melleni (Monogenea: Capsalidae) in ornamental reef fish imported to Brazil

Abstract The capsalid monogenean Neobenedenia melleni is known as a lethal pathogen for captured marine teleost ornamental fish, if left untreated. This study reports the occurrence of N. melleni parasitizing four species of ornamental reef fish imported into Brazil and maintained in quarantine: Arabian angelfish (Pomacanthus asfur ), yellowbar angelfish (Pomacanthus maculosus), regal angelfish (Pygoplites diacanthus), and bluecheek butterflyfish (Chaetodon semilarvatus). Ten days after the beginning of quarantine, some fish showed behavioral alterations, such as irritability, and corneal opacity, which were rapidly diagnosed to be caused by monogenean parasites by body surface scraping. The fish from the same batch were treated with two applications of 2 mg L-1 praziquantel each at an interval of four days. Seven days after the first treatment, the mucus surface of the fish was re-examined, which did not reveal the parasites presence being delivered for commercialization.

Resumo Neobenedenia melleni é conhecido como um parasito letal para peixes teleósteos ornamentais marinhos capturados se não tratado. Este estudo relata a ocorrência de N. melleni parasitando quatro espécies de peixes ornamentais importados para o Brazil: Arabian angelfish (Pomacanthus asfur), yellowbar angelfish (Pomacanthus maculosus), regal angelfish (Pygoplites diacanthus) e bluecheek butterflyfish ( Chaetodon semilarvatus). Dez dias depois do início da quarentena, foram observados irritabilidade e opacidade na córnea dos peixes que, foram diagnosticadas com N. melleni na superfície corporal. Todos os peixes foram tratados com duas aplicações de praziquantel 2 mg L-1 em intervalo de quatro dias. Sete dias após o início do tratamento, um novo exame parasitológico foi realizado o qual não revelou a presença dos parasitos, sendo liberados para comercialização.

Parasitological assessment in the hybrid surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans), with uncommon occurrence of Monogenea parasites / Avaliação parasitológica no híbrido surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans), com ocorrência incomum de parasitos Monogenea

Abstract This study evaluated the parasite fauna of farmed hybrid surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans) and the host-parasite-environment relationship in two fish farms located in Mato Grosso do Sul, Central Brazil, South America. A total of 120 hybrids from two different farms, 60 in each season (30 in the hot and 30 in cold season) were examined during a year. Water quality was weekly measured to evaluate the interaction among environmental conditions and parasitism. Histopathology was used to observe the effects of the parasites and environment on the fish gills. The ciliate protozoan Ichthyophthirius multifiliis and the monogeneans (Ameloblastella sp., Amphocleithrium paraguayensis, Vancleaveus ciccinus, V. fungulus and V. janacauensis) were the most prevalent parasites detected in both seasons in both farms, with prevalence above 80%. It was stated that parasites did not cause important damage in the health status of the hybrid surubim. These results might be related to general good management practices and environmental quality implemented by the fish farmers. The presence of uncommon monogenean parasites to this hybrid compared to their parents causing an environmental and ecological concern is here discussed.

Resumo Este estudo avaliou a fauna de parasitos do surubim híbrido cultivado (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans) e a relação hospedeiro-parasito-ambiente em duas pisciculturas localizadas no Estado do Mato Grosso do Sul, região Centro-Oeste, Brasil. Um total de 120 híbridos de duas fazendas, 60 em cada estação (30 na estação quente e 30 na fria), foram examinados durante um ano. A qualidade da água foi medida semanalmente para avaliar a interação entre as condições ambientais e o parasitismo. Histopatologia foi usada para observar os efeitos dos parasitos e do ambiente nas brânquias dos peixes. O protozoário ciliado Ichthyophthirius multifiliis e Monogenea (Ameloblastella sp., Amphocleithrium paraguayensis, Vancleaveus ciccinus, V. fungulus e V. janacauensis) foram os parasitos mais prevalentes detectados em ambas estações nas duas fazendas, com prevalências acima de 80%. Observou-se que os parasitos não causaram danos ao estado de saúde do surubim híbrido. Esses resultados estão relacionados às boas práticas de manejo e qualidade ambiental implementada pelos produtores. É discutida a presença incomum de Monogenea para esse híbrido, comparado com seus progenitores, podendo causar preocupação ambiental e ecológica.

Probiotic supplementation in diet and vaccination of hybrid surubim (Pseudoplatystoma reticulatum♀ x P. corruscans♂) / Suplementação de probiótico na dieta e vacinação de surubim híbrido (Pseudoplatystoma reticulatum♀ x P. corruscans♂)

ABSTRACT: A supplementary diet with the probiotic bacteria Weissella cibaria on the efficacy of surubim hybrid immunization against a specific hemorrhagic septicemia caused by Aeromonas hydrophila was evaluated on the following treatments: fish fed a supplemented probiotic diet, vaccinated fish and vaccinated fish fed a supplemented probiotic diet, and untreated fish (control). Fish from the probiotic treatments were fed a diet containing W. cibaria for 41 days. On the 15th day of the experiment, fish from vaccine treatments were intraperitoneally vaccinated, with posterior oral booster for four days. One week after the oral booster, three fish from each experimental unit were sampled. The probiotic supplementation increased the number of thrombocytes and lysozyme concentration compared with surubim that did not receive W. cibaria in the diet. On the other hand, the vaccination increased agglutination titer, lysozyme concentration, and antimicrobial activity compared with surubim that were not vaccinated. However, there was no interaction between diet with probiotics and vaccination in the surubim hybrid in the analysed parameters.

RESUMO: A dieta suplementada com a bactéria probiótica Weissella cibaria sobre a eficácia da imunização de surubim híbrido contra a septicemia hemorrágica específica, causada por Aeromonas hydrophila, foi avaliada nos seguintes tratamentos: peixes alimentados com a dieta suplementada com probiótico, peixes vacinados, peixe vacinadas que receberam um probiótico na dieta e peixes não tratados (controle). Peixes dos tratamentos probióticos foram alimentados com uma dieta contendo W. cibaria por 41 dias. No 15o dia do experimento, os peixes dos tratamentos de vacinas foram vacinados intraperitonealmente, com posterior reforço oral por quatro dias. Uma semana após o reforço oral, três peixes de cada unidade experimental foram amostrados. A suplementação de probiótico aumentou o número de trombócitos e concentração lisozima em comparação com surubins que não receberam W. cibaria na dieta. Por outro lado, a vacinação influenciou no aumento do título de aglutinação, a concentração de lisozima e a atividade antimicrobiana, em comparação com os surubins que não foram vacinados. No entanto, não houve interação entre a dieta com probióticos e vacinação no híbrido surubim nos parâmetros analisados.

Development and health status of Centropomus undecimalisparasitized by Rhabdosynochus rhabdosynochus (Monogenea) under different salinity and temperature conditions / Desenvolvimento e estado de saúde de Centropomus undecimalisparasitado por Rhabdosynochus rhabdosynochus (Monogenea) sob diferentes condições de salinidade e temperatura

This study evaluated the correlation of hematological parameters with the mean abundance of the monogenean helminth Rhabdosynochus rhabdosynochus in Centropomus undecimalis reared at different temperatures and salinities. The experimental conditions were: 28 °C/0 ppt (parts per thousand); 28 °C/15 ppt; 28 °C/32 ppt; 25 °C/0 ppt; 25 °C/15 ppt; and 25 °C/32 ppt. The prevalence was 100.0% in fish at 28 °C/15 ppt, 28 °C/32 ppt and 25 °C/15 ppt, which was significantly different (p < 0.05) from those at 25 °C/32 ppt. The red blood cell (RBC) count, hematocrit and total leukocyte (WBC) count were significantly higher in fish at 28 °C/15 ppt and 28 °C/32 ppt. The mean abundance of R. rhabdosynochus, hematocrit and RBC showed positive correlations (P < 0.05) with temperature (ρ= 0.3908; ρ= 0.4771 and ρ = 0.2812). Mean abundance showed negative correlations with hemoglobin (ρ= -0.3567) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) (ρ = -0.2684). No correlation between abundance and salinity was detected among the experimental conditions (ρ = -0.0204). The low numbers of monogeneans recorded (min -1 and max -33) explain the few changes to fish health. This suggests that these experimental conditions may be recommended for development of rearing of C. undecimalis in Brazil, without any influence or economic losses from R. rhabdosynochus.

Este estudo avaliou a correlação dos parâmetros hematológicos com a abundância média de helmintos monogenea Rhabdosynochus rhabdosynochus em robalo-flecha, Centropomus undecimalis, cultivado em diferentes temperaturas e salinidades. As condições experimentais foram: 28 °C/0 ‰; 28 °C/15 ‰; 28 °C/32 ‰; 25 °C/0 ‰; 25 °C/15 ‰; 25 °C/32 ‰. A prevalência (P) foi de 100,0% nos peixes de 28 °C/15 ‰, 28 °C/32 ‰, 25 °C/15 ‰ significativamente diferente (p<0,05) dos peixes de 25 °C/32 ‰ (P=75,0%). O número de eritrócitos, hematócrito e leucócitos totais foram significativamente maiores nos peixes mantidos a 28 °C/15 ‰ e 28 °C/32 ‰. A abundância média de R. rhabdosynochus, hematócrito e número de eritrócitos mostraram correlação positiva (p<0,05) com a temperatura (ρ = 0,3908; ρ = 0,4771 e ρ = 0,2812, respectivamente). Houve correlação negativa da abundância média com a hemoglobina (ρ = -0,3567) e a concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) (ρ = -0,2684). Não houve correlação entre a abundância e a salinidade entre os tratamentos (ρ = -0,0204). O baixo número de Monogenea registrado (mín: 1 e máx: 33) justifica as poucas alterações na saúde dos animais avaliados. Isso sugere que essas condições experimentais de cultivo podem ser recomendadas para um futuro desenvolvimento do cultivo de C. undecimalis no Brasil, sem que haja influência e perdas econômicas associadas a mortalidades, por parasitos R. rhabdosynochus.

Trichodina modesta: an exotic ciliate in the Neotropical region parasitizing an unusual host / Trichodina modesta: exótico ciliado na região Neotropical parasitando hospedeiro não usual

In this study, an important ornamental fish, Betta splendens (Osphronemidae), from three different Brazilian states was examined for parasitic infestations. Smears with parasites were impregnated with silver nitrate or stained using Giemsa for taxonomic evaluation. A disc-shaped trichodinid with a body diameter of 39.7 ± 3.3 µm, adhesive disc diameter of 32.9 ± 3.1 µm and denticulate ring diameter of 19.5 ± 2.0 µm was found. The morphological characteristics resembled those of Trichodina modesta Lom, 1970, a species that shows clear host specificity for Cypriniformes. Until now, its occurrence was restricted to the Eurasian region. In the present study, a new host for T. modesta is reported and therefore the first occurrence of this species in the Americas. The parasite was possibly introduced into the Neotropical region through the exotic fish trade, especially of Cypriniformes used by aquarists. The distribution of this ciliate is discussed and a checklist of localities and hosts for the species is provided.

Neste estudo, o peixe ornamental Betta splendens (Osphronemidae) foi examinado a partir de três diferentes Estados brasileiros para infestações parasitárias. Esfregaços contendo parasitos foram impregnados com nitrato de prata ou corados com Giemsa para avaliação taxonômica. Foi observado o tricodinídeo em forma de disco com 39,7 ± 3,3 µm de diâmetro do corpo, disco adesivo com 32,9 ± 3,1 µm e anel denticulado 19,5 ± 2,0 µm de diâmetro. As características morfológicas foram semelhantes à Trichodina modesta Lom, 1970, uma espécie que apresenta especificidade de hospedeiro por peixes Cypriniformes com ocorrência na Região Euro-asiática. No presente estudo, um novo hospedeiro para T. modesta é reportado, assim como a primeira ocorrência da espécie na América. O parasito tem sido possivelmente introduzido na região Neotropical com o comércio de peixes exóticos, principalmente Cypriniformes usados por aquariofilistas. A dispersão do ciliado é discutida e um “checklist” de localidades e hospedeiros apresentado.

Haematological Parameters of the Hybrid Surubim (Pseudoplatystoma reticulatum x P. corruscans) farmed in Brazil

This study evaluated the haematological parameters of the hybrid surubim (Pseudoplatystoma corruscans x P. reticulatum) farmed in intensive and semi intensive system. A total of 240 fish were examined, 120 from fish farm and 120 from a semi-intensive for comparison between the hot and cold season. The water quality was weekly measured to evaluate the influence of environmental conditions on the haematology. Fish from intensive system showed hematocrit and white blood cell count (WBC) higher in hot season while the total plasmatic protein, hemoglobin concentration, mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and mean corpuscular volume (MCV) were higher in cold season. In fish from semi intensive system, the red blood cells count (RBC) and total thrombocyte number was higher in hot season while the MCHC and MCV were higher in cold season. There was no alterations in the numbers of lymphocytes, neutrophils, basophils, eosinophils and PAS - positive granular leukocyte (PAS-LG). The results showed the influence of seasonality on the hematological parameters of the hybrid surubim kept under normal farming conditions. Regarding water quality, hot season was directly related to increased water temperature and decreased dissolved oxygen while the opposite was found in cold season.